PCR-荧光探针法是一种在PCR反应中利用特定荧光探针实现等量扩增和实时检测的方法,其具有以下特点:
1、高灵敏度:可以检测到非常低浓度的靶分子,其灵敏度可以达到单个分子的水平,对样本的检测结果也非常准确。
2、高特异性:荧光探针的设计可以使其只与目标DNA序列的特定区域结合,并且将靶标和非靶标分子之间的差异扩大,从而减少假阳性率。
3、实时检测:荧光探针法的实时检测方式可以在PCR反应过程中监测扩增产物的积累,有效提高了分析速度和灵敏度。
4、多重检测:可以同时检测多个目标序列,从而大大提高了检测效率和结果的可靠性,并且可以同时检测不同的细菌菌种等。
5、可定量检测:荧光信号的强度与产物的数量成正比,可以通过标准曲线法将荧光信号转换成相应的分子数,实现数量级定量检测。
6、操作简便:不需要任何吸光度检测、凝胶电泳等步骤,只需要添加荧光探针和引物,将反应体系加热到合适的温度后,直接进行PCR反应即可。
总之,PCR-荧光探针法的特点是高灵敏度、高特异性、实时检测、多重检测、可定量检测以及操作简便等,这些优势使得该方法在分子生物学、临床诊断、食品安全检测等领域得到广泛应用。